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Chlamydia Trachomatis (CT) è un batterio intracellulare obbligato e parassita pressoché esclusivo della specie umana, nella quale provoca una molteplicità di quadri morbosi. In mancanza di terapia o di terapia inadeguata, l’iniziale cervicite nella donna o uretrite nel maschio possono condurre a malattia pelvica nella donna, a prostatite e/o epididimite nel maschio. La diagnosi di laboratorio di CT si avvale: (i) dell’esame colturale; (ii) di metodi diretti per la ricerca dell’antigene; (iii) di test sierologici; (iv) di vari saggi (anche commerciali) di amplificazione genica. I metodi non molecolari si sono dimostrati scarsamente specifici e/o sensibili, oppure esageratamente laboriosi. Le tecniche basate sull’amplificazione del DNA (PCR) possono invece offrire una valida base diagnostica nella individuazione ed identificazione di CT. A tale scopo sono state da noi utilizzate sequenze nucleotidiche specifiche localizzate nel plasmide criptico di CT. Questa scelta è stata fatta per aumentare la sensibilità del nostro sistema d’indagine, ospitando ciascuna cellula batterica circa 10 copie del plasmide. Scopo. Verificare in soggetti con disturbi urogenitali la presenza di CT quale segno di infezione celata e/o persistente utilizzando campioni di urine. Materiali e Metodi. Nel corso del 2003 sono stati inseriti nello studio 22 pazienti di età compresa tra 22 e 44 anni, afferenti al servizio CRAIDS. Di questi 13 erano maschi e riferivano sintomi di uretrite, mentre 9 erano femmine con disturbi ginecologici vari, quali bruciore, leucorrea, dolori pelvici. Per valutare la presenza di CT sono stati utilizzati esclusivamente campioni di urine (primo getto). Dopo l’estrazione del DNA batterico (QIAamp DNA Mini Kit, Qiagen) è stata allestita una PCR con primers specifici per il plasmide endogeno di CT, caratterizzata da una sensibilità di 0.1 IFU (Inclusion Forming Units). Risultati e Conclusioni. Quattro (18 %) dei campioni di urine sono risultati positivi, confermandi i dati di prevalenza osservati in individui sintomatici afferenti a centri per le malattie sessualmente trasmesse. Il protocollo di amplificazione applicato in questo studio si è dimostrato estremamente valido nella ricerca del DNA di CT. La possibilità di impiegare urine (anziché campioni ottenuti con procedure invasive) rende attuabile l’utilizzo del saggio in programmi di screening su popolazioni selezionate.

DETERMINAZIONE DI CHLAMYDIA TRACHOMATIS IN CAMPIONI DI URINE MEDIANTE AMPLIFICAZIONE DI GENI PLASMIDICI