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La extraccion de ADN de alta calidad es esencial para realizar estudios a nivel molecular, en diversas especies con abundancia de polifenoles en sus tejidos, como ocurren en las variedades tradicionales de papa y maiz, que dificultan una buena extraccion de ADN genomico. Los polifenoles interfieren en la amplificacion del ADN durante la reaccion en cadena de la polimerasa (PCR), lo que dificulta realizar estudios de marcadores moleculares basados en PCR. Este articulo describe un protocolo simple y robusto de aislamiento de ADN aplicado a variedades tradicionales de papa y maiz obteniendose una concentracion alta, de gran pureza y calidad. El metodo desarrollado se basa en el de Krizman et al. (2006), con modificaciones, probandose en hojas de papa y hojas jovenes de maiz. El metodo propuesto se comparo con un kit comercial de extraccion de ADN y tres metodos descritos para extraccion de ADN de plantas: uno descrito para plantas con altos contenidos de polifenoles (Keb-Llanes et al., 2002), un segundo descrito para Solanaceas y otras planta herbaceas (Fulton et al., 1995), y el metodo de Krizman et al. (2006) original basado en el uso de bromuro de cetyltrimethylammonio (CTAB)-y carbon activado. Mediante este metodo es posible aislar ADN desde genotipos de papa y maiz, con altos contenidos de polifenoles, y obtener ADN de alta calidad que puede ser utilizado para su uso en tecnicas moleculares que involucren la reaccion de PCR y el corte con enzimas de restriccion. El metodo es de corta duracion, similar a la del kit comercial, pero de menor costo. La cantidad de ADN de maiz extraido es superior al utilizar el metodo propuesto, en comparacion con los otros metodos probados.

ciencia e investigación agraria

Simple and robust DNA extraction method for the large-scale analysis of genotypes containing high polyphenolic content, such as landracesof Solanum tuberosum and Zea mays