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El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de la vitrificacion en la viabilidad de ovocitos activados quimicamente para la produccion de embriones partenogeneticos bovinos. Ovocitos bovinos aspirados de ovarios obtenidos en el matadero fueron madurados in vitro por 20-22 horas y se distribuyeron en los siguientes grupos. I (n=76): ovocitos vitrificados/descongelados, II (n=119): ovocitos expuestos a crioprotectantes sin vitrificacion y III (n=142): ovocitos control. Los ovocitos fueron vitrificados en microgotas sobre un papel de aluminio preenfriado flotando en nitrogeno liquido, utilizando una solucion de equilibrio con 4% de etilenglicol y una solucion de vitrificacion con 35% de etilenglicol 5% de polivinilpirrolidona y 0,4 M de trehalosa. Las microgotas vitrificadas fueron almacenadas en nitrogeno liquido y fueron descongeladas 1-3 dias despues del almacenamiento. Los tres grupos de ovocitos se activaron partenogeneticamente por exposicion de 4 minutos a 5 µM de ionomicina de Ca a temperatura ambiente seguido de una incubacion por 5 horas en 6-dimetilaminopurina a 38,5 oC en una atmosfera humeda con 5% CO2. Los embriones se cultivaron en medio mSOF durante 8-9 dias. Las tasas de ovocitos sobrevivientes fueron 55,1% y 93,7% para ovocitos vitrificados/descongelados (I) y expuestos (II) respectivamente. Las tasas de segmentacion de 55,3%, 72,3% y 74,6%, y de desarrollo hasta blastocistos fueron 7,1%, 17,4% y 21,7% en los grupos I, II y III respectivamente. Estos resultados demuestran que la tecnica de vitrificacion ha quedado establecida y permite la produccion de embriones partenogeneticos bovinos.

Vitrificación de ovocitos bovinos y su uso en el desarrollo partenogenético de embriones