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Los efectos de la insulina sobre el tono vascular han sido estudiados tanto in vivo como in vitro mediante variados enfoques experimentales y en diferentes especies. El uso de células disociadas de músculo liso vascular o de células en cultivo permitió obtener información sobre los efectos de la insulina en la modificación de la concentración de Ca2+ intracelular producida por agonistas (43-45), sobre la expresión de transportadores de Ca2+ que regulan su concentración citosólica (40-43), y sobre la expresión de receptores para endotelinas (28,29). El planteo de este trabajo fue el de investigar los efectos de la insulina en el tejido vascular intacto en el cual las células de músculo liso se hallan bajo la regulación paracrina de factores derivados del endotelio. Para ello se seleccionó como principal modelo experimental a la rata debido a que es una especie donde la insulina tiene efectos hipertensores (70) y cuyos vasos o células vasculares aisladas han sido utilizadas en relación a los efectos de insulina (28,30,39,45,81- 83). Como vasos se eligieron uno de conductancia (aorta) y uno de resistencia (arteria de la cola) en la rata; un agonista fue testeado en segmentos de venas safenas humanas por la importancia de su rol en la regulación del tono vascular y la posibilidad de que la insulina modificara sus efectos. Los agonistas utilizados fueron todos de importancia fisiológica: noradrenalina, angiotensina II, arginina- vasopresina y endotelina 1. Los protocolos experimentales se diseñaron teniendo en cuenta las concentraciones de hormona y los períodos de tiempo de incubación con los que en la bibliografía se demostraban modificaciones en la concentración de Ca2+ citosólico y en la expresión de transportadores de Ca2+ inducidas por la insulina en células de músculo liso vascular aisladas. Para profundizar en el estudio de los efectos de la insulina sobre el retículo sarcoplásmico y sobre los canales de Ca2+ de la membrana plasmática se utilizaron también preparaciones de vasos hiperpermeabilizados por tratamiento químico y de células en cultivo derivadas de músculo liso aórtico de rata. Los objetivos propuestos fueron establecer si la preincubación con insulina: • modifica las contracciones inducidas por agonistas fisiológicos. • media sus efectos a través de fosforilaciones en tirosina. • afecta a las contracciones inducidas por endotelina 1 a través de la modificación de: - la síntesis de óxido nítrico y de derivados de la ciclooxigenasa. - el influjo de Ca2+ desde el medio extracelular. - la liberación de Ca2+ desde depósitos intracelulares. - las fosforilaciones dependientes de proteína quinasa C. • regula la actividad del retículo sarcoplásmico. • regula la actividad de los canales de Ca2+ de la membrana plasmática

Rol de la insulina en la regulación del calcio citosólico del músculo liso vascular