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VII Abreviaciones VIII 1 Introduccion general 1 1.1 Los triatominos 1 1.2 Genomica de insectos 2 1.3 Biologia del desarrollo 3 1.3.1 Componentes comunes en el desarrollo embrionario del reino animal. 3 1.3.2 Desarrollo embrionario de Rhodnius prolixus 4 1.3.3 Mecanismos de segmentacion 6 1.4 Objetivos 9 2 Materiales y Metodos 10 2.1 Colonia de R. prolixus 10 2.2 Genoteca de ADNc normalizada de R. prolixus. 10 2.2.1 Extraccion de ARN total 10 2.2.2 Produccion de ADNc. 11 2.2.3 Normalizacion de la genoteca de ADNc. 13 2.2.4 Fraccionamiento y clonado 15 2.3 Busqueda de genes de segmentacion 16 2.3.1 Busqueda bioinformatica 16 2.3.2 Analisis de secuencias. 17 2.3.3 Validacion de las predicciones por PCR y clonado 18 2.4 Tecnicas embriologicas 19 2.4.1 Colecta de embriones, diseccion y extraccion de ovariolas. 19 2.4.2 Hidridacion in situ 19 2.4.2.1 Sintesis de las sondas de ARN. 20 2.4.2.2 Tincion de embriones y ovariolas con sondas marcadas con Dig. 20 2.4.3 ARNi parental. 22 3 Genoteca de ESTs normalizada de R. prolixus. 23 3.1 Introduccion 23 3.1.1 Estrategias y metodos de secuenciacion. 23 3.1.2 Busqueda de similitud y homologia de secuencia 25

Análisis genómico-funcional de la embriología de <i>Rhodnius prolixus</i> (Ståhl, 1859) (Hemíptera, Reduviidae)