English (United Kingdom)

https://curated-unify.zendy.io/wp-json/zendy-region/v1/featured_content/oa?rat=en

https://curated-unify.zendy.io/wp-json/zendy-region/v1/highlighted_journal/

Global: Zendy Plus annual

Presents the access of premium content as premium feature

Premium Content

Presents the keyphrase highlighting as premium feature

Keyphrase Highlighting

Presents the summarisation as premium feature

Summarisation

Insights

Presents the pdf analysis as premium feature

PDF Analysis

Presents the zaia usage as premium feature

ZAIA

Global: Zendy Tools annual

Global: Zendy Free Plan

Global: Zendy Tools monthly

Global: Zendy Plus monthly

Metode mikrokoloni (slide culture) sebagai metode diagnostic alternative yang lebih cepat untuk diagnosis tuberculosis paru Microcolony (slide culture) method as an alternative diagnostic method for rapid diagnosis of pulmonary tuberculosis Eko Budi Koendhori, Setio Harsono Department of Microbiology, AIRLANGGA UNIVERSITY School of Medicine, Surabaya Mycobacterium tuberculosis; Ziehl Neelsen; Lowenstein Jensen; sputum Despite wide distribution of pulmonary tuberculosis in Indonesia, its diagnosis is still an important issue to be dealt with. Fourty seven sputums from pulmonary tuberculosis patients in Surabaya were examined to detect Mycobacterium tuberculosis using three methods, i.e. the acid fast stain Ziehl Neelsen, microcolony (slide culture) and Lowenstein Jensen. Sputums were collected spontaneously from the patients. All of them were decontaminated and centrifuged. After the supernatant fluids were carefully decanted, the sediments were resuspended in 1 ml of 10 mM phosphate buffer (pH 7.4) and the suspensions were then inoculated on to two 76 x 13 mm glass microscope slides. One of them was stained by Ziehl Neelsen method and the other was inoculated into microcolony media for seven days and the waste suspension was inoculated into Lowenstein Jensen media. The results of the microcolony method analysis were compared with the Ziehl Neelsen staining. Employing McNemar test, a significant difference was observed between the microcolony method and the Ziehl Neelsen staining (χ2 = 5,88). The sensitivity and spesificity of microcolony were 100% and 89% while the Ziehl Neelsen were 60% and 84% respectively. In conclusions microcolony method was better compared with the Ziehl Neelsen staining in the detection of Mycobacterium tuberculosis. Microcolony method was able to reduce time required to detect Mycobacterium tuberculosis in patient suspected with pulmonary tuberculosis. Di Indonesia penyakit tuberkulosis (TB) masih merupakan masalah kesehatan, dan diperkirakan sekitar 500.000 orang setiap tahunnya menderita TB paru dengan basil tahan asam (BTA) positif. Menurut Survey Kesehatan Rumah Tangga (SKRT) oleh Departeman Kesehatan tahun 1992 ternyata TB merupakan penyebab kematian ke dua di Indonesia, sedangkan menurut Survey Kesehatan Rumah Tangga tahun 1986 TB masih menduduki peringkat ke empat dalam pola penyebab kematian di Indonesia (Ignatia & Handojo, 1997). Sampai saat ini diagnosis laboratorium penyakit tuberkulosis masih merupakan masalah yang penting di Indonesia (Handojo, 1996). Telah banyak uji laboratorium untuk tuberkulosis (TB) yang dikembangkan dan dipakai di Indonesia, namun belum ada satupun yang secara tunggal benar-benar dapat memenuhi syarat dari suatu uji laboratorium yang ideal untuk tuberkulosis di Indonesia (Handojo, 1996). Dalam rangka pencarian kasus tuberkulosis guna mematahkan rantai penularan penyakit, untuk negara berkembang seperti Indonesia, dibutuhkan sarana diagnostik yang tidak saja bersifat andal (sensitif dan spesifik) tetapi juga praktis dalam pelaksanaannya dan murah biayanya (Handojo, 1996). Dalam hal ini, peran uji BTA dahak sebagai uji laboratorium penyaring yang terdepan, masih belum sepenuhnya bisa digantikan oleh uji laboratorium yang lain, sebab sampai saat ini belum ada uji laboratorium untuk TB yang sekaligus lebih sederhana, lebih murah dan lebih spesifik daripada uji BTA dahak. Sayangnya uji BTA dahak ini kurang sensitif (Handojo, 1996; Kim et al., 1984). Kultur kuman pada media padat merupakan cara pemeriksaan yang paling akurat karena memiliki sensitivitas dan spesifisitas yang tinggi sebagai diagnosis pasti Mycobacterium tuberculosis, akan tetapi metode ini masih memiliki kelemahan dalam hal kecepatannya. Untuk kultur konvensional yang menggunakan media Lowenstein Jensen paling tidak dibutuhkan waktu antara 3-8 minggu (Jonas et al., 1993; Abe et al., 1992). Correspondence : Dr. Eko Budi Koendhori, M.Kes., Department of Mikrobiology, Airlangga University School of Medicine, Surabaya, Jalan Mayjen. Prof. Dr. Moestopo 47, Surabaya, E-mail dr_ekokoen@yahoo.com Dalam penelitian ini peneliti memodifikasi tehnik kultur mikrokoloni (slide culture) yang menggunakan darah sebagai bahan baku dari medianya. Dengan tehnik mikrokoloni selain bisa didapatkan hasil yang lebih cepat juga lebih murah karena tidak diperlukan media khusus seperti Lowenstein Jensen atau yang lainnya namun cukup dengan media darah manusia yang bisa diambil dari darah di PMI yang tidak terpakai. BAHAN DAN CARA KERJA Bahan Bahan penelitian diambil dari sputum yang diperiksa di Laboratorium Mikrobiologi RSUD Dr.Soetomo dan dari Ruang Penyakit Paru RSUD Dr.Soetomo. Cara Kerja Pengambilan Spesimen Spesimen diambil dari sputum pasien secara spontan pada pagi hari, mula-mula pasien disuruh menarik nafas dalam, ditahan sebentar, kemudian dibatukkan dengan kuat. Air liur dan lendir dari hidung dibuang. Sputum harus bebas dari partikel makanan dan sisa kotoran lain (Baron et al., 1992). Dekontaminasi Spesimen Semua spesimen didekontaminasi dengan sodium hidroksida. Dua bagian volume dari NaOH 4% dicampur dengan spesimen sputum dalam sebuah tabung mixer dan diaduk selama 15 detik, kemudian didiamkan selama 15 menit dalam suhu ruangan. Selanjutnya ditambahkan 10 bagian volume bufer fosfat 10 mM (pH 7,4), lalu disentrifugasi dengan kecepatan 3000 x g selama 30 menit. Setelah supernatan dibuang maka endapannya disuspensikan dengan 1 ml bufer yang sama kemudian dibuat hapusan (Welch et al., 1993; Lennette et al., 1985). Pembuatan preparat hapus Gelas obyek ukuran 76 x 26 mm dipotong memanjang sehingga bisa dimasukkan ke dalam tabung screwcapped. Hapusan dibuat dengan jalan menghapuskan sputum yang telah didekontaminasi di atas gelas obyek seluas kurang lebih 25 x10 mm kemudian dibiarkan mengering tanpa pemanasan (Allen, 1981). Pembuatan media mikrokoloni Media dasar dibuat dengan jalan mencampurkan satu bagian volume darah dengan dua bagian volume air suling. Untuk lebih memastikan terjadinya lisis darah secara komplit maka ditambahkan larutan steril saponin putih hingga mencapai konsentrasi akhir 500 mg/l. Media kemudian dimasukkan ke dalam tabung screw-capped dan bisa disimpan dalam suhu 4° C selama lebih dari 4 minggu (Allen, 1981). Penanaman dengan metode mikrokoloni Preparat hapus dimasukkan ke dalam botol yang mengandung media yang telah dibuat sampai hapusannya terendam media dan diinkubasi selama 7 hari pada suhu 37° C. Setelah diinkubasi preparat hapus dikeluarkan dari media, dicuci pelan-pelan dengan air suling kemudian dicelupkan dalam larutan glutaraldehida 2% selama 30 menit. Hapusan kemudian diwarnai dengan pewarnaan Ziehl Neelsen lalu dilihat di bawah mikroskop. Bila ada pertumbuhan mikroorganisma akan terlihat bentukan batang merah bahkan sering membentuk “cord formation” (Allen, 1981). Penanaman pada media Lowenstein Jensen Sputum yang telah didekontaminasi ditanam pada media Lowenstein Jensen kemudian pertumbuhan koloni kumannya diamati mulai minggu pertama sampai ke delapan. Setelah tampak pertumbuhan koloni kumannya, koloni diambil lalu dibuat hapusan pada gelas obyek kemudian diwarnai dengan pewarnaan Ziehl Neelsen. Pembacaan hapusan Ada beberapa kriteria pembacaan hasil pewarnaan Ziehl Neelsen, American Lung Association sebagaimana yang tercantum dalam Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology edisi 9 membuat kriteria sebagaimana terlihat pada Tabel 1 (Baron & Finegold,1992). Tabel 1. Kriteria hasil pembacaan BTA Jumlah BTA terlihat Pelaporan 1-2 per hapusan specimen negatif 3-9 per hapusan jarang (+1) 10 atau lebih per hapusan sedikit (+2) 1 atau lebih per lapang pandang dengan oli imersi banyak (+3) Dalam hal ini peneliti menggunakan kriteria yang dibuat oleh American Lung Association tersebut dengan sedikit modifikasi yaitu untuk kriteria penilaian negatif adalah ditemukan BTA sebanyak 02 untuk tiap hapusan spesimen, sedangkan untuk penilaian positif (+1), (+2) dan (+3) dianggap sebagai positif saja.