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A técnica "Random Amplified Polymorphic DNA" (RAPD) surgiu como uma ferramenta útil para testar a pureza genética e a discriminação de cultivares em muitas espécies. É uma técnica simples, rápida, relativamente de baixo custo e permite o uso de DNA extraído de sementes secas, o que é muito importante em um programa de análise de sementes. O uso desta tecnologia no teste da pureza genética pode ser muito interessante para algumas espécies, como a vinca (Catharanthus roseus (L.) G.Don), pois pouco se conhece a respeito da seqüência de seu DNA. É interessante, também, pelo fato de existir grande número de "primers" comercialmente disponíveis, que podem ser prontamente utilizados para gerar dados. Essa técnica pode ser mais facilmente utilizada para gerar padrões de bandas polimórficas suficientes para discriminar genótipos diferentes. Todavia, no presente estudo, os padrões RAPD de bandas obtidas de amostras de DNA extraído de sementes de vinca em "bulk" foram não-consistentes, o mesmo ocorrendo com o uso de DNA extraído de sementes individuais de um mesmo cultivar, o que evidencia que a técnica não é aplicável para testar a pureza genética e a discriminação de cultivares de vinca. Entretanto, os padrões de bandas RAPD gerados a partir de DNA extraído de tecido foliar de plântulas foram mais reproduzíveis e poderiam ser considerados na caracterização de cultivares. The Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) technique appears useful for genetic purity testing and variety discrimination for several crops. It is simple, fast, relatively inexpensive and allows the use of DNA extracted from dry seeds, which is important in a seed-quality testing program. This genetic purity testing approach may be very attractive for species such as vinca (Catharanthus roseus (L.) G.Don) because little is known concerning the DNA sequence and a number of commercial primers can be utilized to achieve polymorphic banding patterns to discriminate genotypes. However, in this study, RAPD banding patterns obtained from bulked vinca seed were not consistent. Similar inconsistent results were found for RAPD banding patterns of individual vinca seeds from the same cultivar. Thus, the low stringency requirements of RAPDs may be responsible for these irreproducible and unexpected results. In addition, this highly sensitive technique still requires further standardization of test protocol. These findings suggest that RAPD fragments obtained on electrophoretic gels are not applicable for genetic purity testing and variety discrimination in vinca flower seeds. However, RAPD banding patterns acquired from seedling leaf tissue of vinca were more reproducible

revista brasileira de sementes

Análise da pureza genética e discriminação de cultivares de vinca (Catharanthus roseus (L.) G.Don) usando "random amplified polymorphic DNA" em DNA extraído de sementes e folhas