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El objetivo del presente estudio fue determinar, mediante la tecnica de RT-PCR Tiem- po Real y cuantificacion relativa segun el metodo 2-Ct, los niveles relativos de expresion in vitro de ARN mensajero de IL-2 e IL-10 en leucocitos circulantes de alpacas en presencia de antigenos clostridiales, empleandose como control endogeno a GAPDH. Se colecto sangre entera de 10 alpacas adultas. Las muestras fueron centrifugadas para obtener la fraccion leucocitaria en gradiente de Ficoll, colectandose la capa flogistica. Se hizo un pool de leucocitos que fueron purificados con cloruro de amonio. Se centrifugo y la concentracion se ajusto a 500 000 celulas vivas/ml de medio minimo esencial (MEM). Fueron cultivados en placas para cultivo celular de 24 pocillos y enfrentados a suspensiones de extracto clostridial a las concentraciones de 400, 16, 0.8 y 0.2 µg/ml por 1, 12 y 24 h. Posteriormente, se realizo la RT-qPCR. La cinetica de la expresion de IL-2 mostro una tendencia no significativa inversamente proporcional a la dosis de antigeno clostridial en los tres tiempos de incubacion, a diferencia de IL-10 cuya expresion fue variable, alcan- zando el maximo a las 12 h de incubacion (p<0.05) y mostrando un patron similar al de IL-2 en la dosis de 16 µg/ml de antigeno clostridial. La expresion de IL-10 supero hasta en 40 veces lo expresado por el calibrador respecto a IL-2, evidenciandose una marcada respuesta hacia la polarizacion del subtipo Th2.

EXPRESIÓN in vitro DE LAS INTERLEUCINAS 2 Y 10 DE LINFOCITOS DE ALPACAS (Vicugna pacos) EN PRESENCIA DE ANTÍGENOS CLOSTRIDIALES