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El objetivo del estudio fue evaluar el efecto de dos metodos de criopreservacion sobre la supervivencia in vivo e in vitro de embriones de llama. Se recuperaron 73 embriones en estadio de blastocisto eclosionado mediante una tecnica no quirurgica a los 6.5 dias post servicio en llamas superestimuladas. Las llamas receptoras se distribuyeron aleatoriamente en grupo Control (n = 14), de vitrificacion (n=30) y de congelacion lenta (n=29). Para la vitrificacion, los embriones fueron expuestos a la solucion de vitrificacion (SV) conteniendo 20% Glicerol + 20% Etilenglicol + 0.5M Sucrosa + 10% suero fetal bovino (SFB) + 50 μg/ml sulfato de gentamicina, y sumergidos en nitrogeno liquido dentro de pajillas de 0.25 ml. Para la congelacion lenta, los embriones fueron expuestos a fosfato buffer salino (PBS) con 1.5 M de Etilenglicol + 10% de SFB + 50 μg/ml de sulfato de gentamicina, aspirados en pajillas de 0.25 ml, y enfriados a una tasa de descenso de 0.12 °C/min hasta 5 °C y, luego, en la boca del tanque de nitrogeno, se continuo el descenso a una tasa de 5 °C /min hasta -20 °C por 5 min, y luego se sumergieron en el nitrogeno liquido. En la descongelacion se utilizaron soluciones de dilucion conteniendo dos concentraciones de sucrosa: 0.5 M y 0.2 M para congelacion lenta y 0.25 M y 0.12 M para vitrificacion. Se realizo una evaluacion in vivo a todos los embriones del grupo control y al 50% de los embriones de los dos grupos experimentales, mediante transferencia directa a hembras receptoras previamente sincronizadas. El diagnostico de prenez se llevo a cabo por ecografia transrectal a los 20 y 30 dias. La prenez fue de 4/13, 2/12 y 0/11 para las receptoras de los grupos Control, Vitrificados y Congelacion lenta, respectivamente, sin diferencia estadistica. Para la evaluacion in vitro, los embriones criopreservados fueron cultivados en PBS + 20% SFB, en una atmosfera compuesta por 5% de CO2, 20% de O2 y 75% de N2, durante 1 h a 39 °C, y se observo su re-expansion mediante la observacion de su morfologia. Se obtuvo 75.0% (9/12) de re-expansion en embriones vitrificados y 57.1% (4/7) en embriones congelados lentamente (4/7), sin diferencia significativa. Los resultados permiten concluir que la vitrificacion podria ser el metodo adecuado para la criopreservacion de embriones de llama.

EVALUACIÓN DE DOS MÉTODOS DE CRIOPRESERVACIÓN DE EMBRIONES DE LLAMAS SOBRE LAS TASAS DE SUPERVIVENCIA in vivo e in vitro.