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In früheren Veröffentlichungen ist die Isolierung der Innenkomponente des Newcastle disease-Virus (NDVirus) (Stamm „Italien“) beschrieben worden1,2. Durch Behandeln der gereinigten Viruspartikel mit Äther wurden stäbchenförmige Strukturen gewonnen, die in ihrem Feinbau an das Tabakmosaikvirus erin­ nern. Wie Untersuchungen mit Phosphorwolframsäure zeigten, waren neben diesen stäbchenähnlichen Gebil­ den in den gewonnenen Präparaten gelegentlich roset­ tenähnliche Strukturen enthalten. Es wurde vermutet, daß es sich hierbei um die „Hämagglutinin“-Komponente des ND-Virus handelt. Beim Stamm „Italien“ konnte die hämagglutinierende Komponente durch die übliche Ätherbehandlung3 nicht in größerer Menge in der wäßrigen Phase gewonnen werden. Es zeigte sich aber im Laufe der Untersuchungen, daß dies beim Stamm „Beaudette“ möglich ist. Das Virus wurde zunächst durch Chromatographie an Calciumphosphat-Säulen aus infizierter Eiflüssigkeit abgetrennt4 und durch anschließendes zweimaliges Zen­ trifugieren (pi 5) gewaschen. Das Schütteln mit Äther erfolgte im Prinzip nach der von S c h ä f e r und Z i l l i g 3 angegebenen Methode. Zusätzlich wrurden die erhalte­ nen Wasserphasen dreimal je 10 Min. bei hoher Fre­ quenz in einer Schüttelmaschine in der Kälte geschüttelt. Der danach in der Wasserphase enthaltene Äther wurde durch Durchblasen von Stickstoff entfernt. Schwierig­ keiten machte zunächst die Abtrennung des Hämagglu­ tinins von den übrigen Spaltprodukten. Sie war schließ­ lich mit folgender Methode ohne größere Aktivitäts­ verluste möglich: Das Hämagglutinin wurde in Trispuffer ph 9 an gewaschene Hühnererythrozyten adsor­ biert, die anschließend zweimal im gleichen Puffer und einmal in physiologischer NaCl-Lösung in der Kälte gewaschen wurden. Die Elution des Hämagglutinins er­ folgte dann in gepufferter NaCl-Lösung, pn 7,2, bei 37 °C (30 Min.). Aus den Eluaten ließ sich das häm­ agglutinierende Spaltprodukt durch Zentrifugieren bei pi 100 ohne größere Verluste ausschleudern. Auf die beschriebene Weise wurden aus 2 0 ml eines gereinigten Viruskonzentrates mit 65 000 HA-Einheiten/ml 1,5 ml Hämagglutinin-Konzentrat mit 500 0 0 0 HA-Einheiten/ ml gewonnen. Das Hämagglutinin-Konzentrat besaß eine hohe spe­ zifische hämagglutinierende Aktivität, die mit der rein­ ster Hämagglutinin-Präparate der Influenza-Viren ver­ gleichbar ist5. Sie betrug l,5-10~9g N/HA-Einheit. Durch spezifische Antiseren konnte seine hämagglutinie­

Notizen: Isolierung und Eigenschaften der hämagglutinierenden Komponente des Virus der Newcastle Disease