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Die Methode beruht auf der kompetitiven Hemmung einer j3-Lactamase durch ein /3-Lactam-Antibiotikum (4, 5, 6). Das Cephalospprinderivat Padac (Abb. 2) (7) wird von der j3-Lactamase aus Enterobacter cloacae P99 leicht hydrolysiert. Dabei ist ein Farbumschlag von rot nach gelb zu beobachten, der im Photometer bei 550 nm zu verfolgen ist. Die Umsetzungsgeschwindigkeit dieses leicht spaltbaren Cephalosporins wird nach Zugabe von Cefotaxim durch eine kompetitive Hemmung verringert, wobei der Grad der Enzymhemmung mit der Menge Cefotaxim in der zu analysierenden Probe korreliert ist. Als leicht umzusetzendes Substrat eignet sich auch Cephaloridin, wobei die Absorptionsanderung bei 255 nm gemessen werden mus.

Eine enzymatische Methode zur Bestimmung von Cefotaxim in Serum- und Harnproben