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Auf der Suche nach einem geeigneten Verfahren, Farbstoffe säulenchromatographisch zu reinigen, wurden Versuche mit Cellulosepulver, Ionenaustauscher und Dextran-Gel durchgeführt. Dabei erwies sich das Dextran-Gel Sephadex in Handhabung und Trenndauer als sehr einfach und günstig gegenüber den umständlicheren anderen Verfahren. Nach DETERMANN (1) beruht das Prinzip der Gelchromatographie mit Sephadex auf der Stofftrennung auf Grund von Molekulargewichtsunterschieden, d. h. große Moleküle penetrieren normalerweise nicht wie die kleinen in die Gelmatrix und können deshalb vor den kleinen Molekülen eluiert werden. Da es sich hier aber um die Fraktionierung von Stoffen etwa gleichen Molekulargewichts handelt, müssen zusätzliche Mechanismen bestehen, die die Trennung, etwa gleich großer Moleküle in einem Gel bewirken, in das sämtliche Moleküle penetrieren können. Wechselwirkungen zwischen den gelösten Ionen und der Gelmatrix können bei der Verwendung ionenfreien Elutionsmittels entstehen, da in der Sephadexmatrix eine geringe Zahl von Carboxylgruppen verankert ist (2), etwa 0,1 bis 0,2/^Val/g trockenes Sephadex (1). Zum anderen zeigen aromatische, homozyklische wie heterozyklische Verbindungen ein abweichendes Elutionsverhalten, wie verschiedene Experimente aufgezeigt haben (3, 4, 5, 6). Inwieweit bei der Trennung gleich großer Moleküle der Effekt durch das Gelgerüst selbst durch das Einwirken Coulombscher Kräfte und Dispersionskräfte erreicht wird oder eine irgendwie anders geartete Adsorption an das hochmolekulare Gel stattfindet, bleibt biskng noch unklar. Nach neuesten Untersuchungen von DETERMANN und WALTHER (7) sollen Äthergruppen im Sephadexgerüst für die starke Adsorption von aromatischen Substanzen verantwortlich sein. Auf Grund dieser Beobachtungen, vor allem auch an Azoverbindungen, empfehlen BÄTZ (8) und PARRISH (9) die Benutzung von Sephadex zur Reinigung von Azofarbstoffen.

clinical chemistry and laboratory medicine

Präparative Darstellung von reinen zur Anfärbung von Elektropherogrammen geeigneten Farbstoffen mittels Sephadex.  II. Mitteilung zur Methodik der Serum-Elektrophorese