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Protein-O-Mannosyltransferasen (Pmt-Proteine) katalysieren die Anknupfung des ersten Mannosylrestes an sekretorische Zielproteine. Funf Isoformen (Pmt1, Pmt2, Pmt4, Pmt5 und Pmt6) wurden bei dem pathogenen Pilz Candida albicans identifiziert. In dieser Arbeit wurde die Regulation der PMT-Gene auf der Transkript- und Promotorebene untersucht. Auserdem wurden Signalwege etabliert, die an der Detektion und Weiterleitung der defekten O-Mannosylierung beteiligt sind. Die Deletion einzelner PMT-Gene verursachte Veranderungen der Expression anderer PMT-Gene. So wurden ein erhohter PMT2-Transkriptspiegel in der pmt1- Mutante und ein erhohter PMT4-Transkriptspiegel in dem heterozygoten pmt2/PMT2- Stamm festgestellt. Bei Behandlung des Wildtyps mit dem Pmt1-Inhibitor OGT2371 stiegen die PMT2- und PMT4-Transkriptspiegel, in einer moglichen kompensatorischen Antwort, ebenfalls an. Unerwarteterweise wurde in der pmt6-Mutante und dem pmt2/PMT2-Stamm auch eine Erniedrigung des PMT1- bzw. PMT6-Trankriptspiegels beobachtet. In Anwesenheit von Zellwand- und Glykosylierungs-Inhibitoren, sowie in entsprechenden Mutanten, wurde eine Erhohung des PMT1-Transkriptspiegels festgestellt. Dagegen wurde der PMT2-Transkriptspiegel in Gegenwart des NGlykosylierung- Inhibitors Tunicamycin erniedrigt. Das PMT1-Gen wird auf der Promotorebene durch Zellwanddefekte reguliert. Zwei Promotorregionen stromaufwarts des Transkriptionsstartpunktes, Del1 und 2Del2, wurden fur eine vollstandige Aktivierung der Transkription benotigt. Die Deletion zwei weiterer Regionen, Del3 und 3Del4, ergab eine hohere basale Aktivitat, moglicherweise weil Bindestellen von Repressorproteinen eliminiert wurden. Die PMT2- und PMT4- Gene besitzen stromaufwarts kurze intergenische Regionen (333 bzw. 369 bp). Fur den PMT2-Promotor wurde unter den untersuchten Bedingungen keine Regulation der Promotorfusionen durch Tunicamycin festgestellt. Fur das PMT4-Gen wurden in Anwesenheit von Tunicamycin entgegengesetzte Ergebnisse auf der Transkript- und Promotorebene festgestellt. Beide Gene scheinen deswegen auf der posttranskriptionellen Ebene reguliert zu werden. Die Ergebnisse zeigen, dass die Signalwege des Membransensors Msb2, der MAP Kinase Cek1, der Phosphatase Calcineurin und des Transkriptionsfaktors Ace2 die Antwort auf defekte O-Mannosylierung bzw. die Expression der PMT-Gene regulieren. Das PMT1-Transkript wurde in den msb2-, cek1- und ace2-Mutanten so hoch wie im Wildtyp nach Tunicamycin-Behandlung induziert. Dieses Ergebnis deutet darauf hin, dass die Msb2-, Cek1- und Ace2-Proteine die PMT1-Expression bei intakter NGlykosylierung reprimieren. Andererseits werden diese drei Proteine fur die basale Expression der PMT2- und PMT4-Gene und ihre Induktion als Antwort auf defekte Pmt1-O-Glykosylierung benotigt. Bei intakten Zellen reprimiert dagegen der Calcineurin-Weg die Expression von PMT1 und er wird fur die basale Expression der PMT2- und PMT4-Gene benotigt.

Rutas de glicosilación en Candida albicans: circuitos reguladores y efectos sobre virulencia