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[ES]La produccion de antibioticos en bacterias del genero Streptomyces es un proceso que responde a multiples senales y se encuentra estrictamente regulado a distintos niveles. Los Sistemas de Dos Componentes (TCS) son las principales vias de transduccion de senales en estos microorganismos, al igual que en el resto de las bacterias, y estan formados por una Histidina Quinasa sensora (HK) y un Regulador de Respuesta (RR). El sistema AbrC1/C2/C3 de Streptomyces coelicolor es un TCS conservado y atipico, formado por dos HKs (AbrC1 y AbrC2) y un RR (AbrC3), y que esta involucrado en la regulacion positiva de la produccion de los antibioticos actinorrodina (ACT), undecilprodiginina (RED) y el antibiotico dependiente de calcio (CDA) y tambien de la diferenciacion morfologica.El objetivo de esta tesis ha sido estudiar la relevancia del RR AbrC3 en la produccion de antibioticos de forma independiente a las HKs del sistema en S. coelicolor.El analisis fenotipico del mutante carente de abrC3 ha mostrado que esta cepa, al igual que el triple mutante de todo el sistema, produce menor cantidad de ACT y RED, pero no de CDA y la diferenciacion morfologica tambien se encuentra retrasada.Estudios de transcriptomica, realizados mediante microarrays, han detectado la subexpresion de la mayoria de los genes del cluster de la ACT en el mutante que carece del gen abrC3. Entre ellos actII-ORF4, el activador final de la expresion del cluster. Otros genes subexpresados relacionados con el metabolismo primario son acdH y rplP, con el metabolismo secundario como absR1, afsS y sIHF y con la diferenciacion morfologica como bdtA y wblE. Entre los genes regulados negativamente por AbrC3 se encuentra rplP, codificante de la proteina ribosomal L16 de la subunidad 50S.Ensayos ChiP-chip y ensayos de retardo en gel (EMSAs) permitieron identificar in vivo los genes cuya expresion se encuentran directamente regulada por el RR. Los resultados han mostrado que AbrC3 reconoce la secuencia de diez nucleotidos 5-GAASGSGRMS-3 en los genes cuya expresion regula como actII-ORF4, abrC3, absR1, SCO0736, bfr, bdtA y SCO6809.Ademas, la sobreexpresion de abrC3 en bajo numero de copias ha mostrado un efecto inductor de la produccion de ACT en S. coelicolor y S. lividans, y en S. argillaceus estimula la sintesis de metabolitos secundarios no identificados. Ensayos de sobreexpresion de abrC3 en alto numero de copias y de complementacion de la cepa mutante triple han mostrado que AbrC2 presenta mayor actividad que AbrC1 a la hora de fosforilar a AbrC3.Por ultimo, para continuar estudiando la cascada de senalizacion en la que interviene el TCS AbrC1/C2/C3 se han construido las cepas mutantes de algunos reguladores relacionados con el sistema como el RR huerfano Aor1 y el factor de transcripcion AbsR1, siendo un activador y un represor respectivamente, de la sintesis de antibioticos y de la diferenciacion morfologica.

Caracterización de AbrC3, un regulador de respuesta positivo de la producción de antibióticos en Streptomyces coelicolor