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 O sucesso da transformação genética do morangueiro (Fragaria x ananassa) é grandemente influenciado pela cultivar utilizada e dependente da eficiente regeneração e seleção do material transformado. Na regeneração das plantas, a organogênese depende da concentração de reguladores de crescimento presente no meio de cultivo e varia de acordo com a fonte de explante e a cultivar utilizada. Da mesma forma, na seleção das plantas transformadas, a sensibilidade à agentes seletivos induzida por genes marcadores, depende da concentração da substância seletiva no meio de regeneração e deve ser ajustada de acordo com a cultivar utilizada. O objetivo deste trabalho foi testar diferentes combinações e concentrações de TDZ (Thidiazuron) e AIB (Ácido Indolbutírico) adicionados ao meio básico MS (MURASHIGE; SKOOG, 1962) para a regeneração de brotos das cvs. Camiño Real e Festival a partir de explantes foliares e explantes peciolares. Para a cv. Camiño Real foram testados 1,0; 1,5 e 2,0 mg L-1 de TDZ combinadas com 0,1; 0,3 e 0,5 mg L-1 de AIB e para a cv. Festival foram testados 1,0; 1,5 e 2,0 mg L-1 de TDZ combinados com 0,1 e 0,3 mg L-1 de AIB. A partir dos resultados de regeneração, também se buscou definir a menor concentração do agente seletivo canamicina (gene marcador npt II), capaz de inibir a regeneração de brotos não transformados, testando-se adições de 0, 2, 4, 6, 8 e 10mg L-1 de canamicina ao meio de regeneração pré-estabelecido. Para ambas as cultivares não foram obtidos brotos com desenvolvimento normal a partir de explantes peciolares, sendo avaliadas apenas a regeneração e sensibilidade à canamicina de brotos regenerados a partir de explantes foliares. Para a cv. Camiño Real foi estabelecida a melhor regeneração de brotos na combinação 2,0mg L-1 de TDZ + 0,1mg L-1 de AIB enquanto que para a cv. Festival foram 2,5mg L-1 de TDZ + 0,1mg L-1 de AIB. Com relação a sensibilidade à canamicina, foi observada total inibição de brotos com 10mg L-1 de canamicina para ambas as cultivares estudadas.The success of genetic transformation of the strawberry (Fragaria x ananassa) is strongly influenced by the cultivar and depends on efficient regeneration and plant-transformed selection. In plant regeneration, efficient organogenesis depends on the concentrations of plant growth regulators that are present in the culture medium, and the response varies according to the explant type and cultivar. Similarly, in the selection of transformed plants, the sensitivity to selective agents induced by marker genes depends on the concentration of the selective substance in the regeneration medium and must be adjusted according to the chosen cultivar. The aim of this work was to test different combinations and concentrations of TDZ (Thidiazuron) and IBA (indolebutyric-acid) added to the base medium MS (MURASHIGE; SKOOG, 1962) for shoot regeneration of Camiño Real and Festival cultivars from leaf and petiole explants. In the case of ‘Camiño Real’, 1.0, 1.5 and 2.0 mg L-1 of TDZ combined with 0.1, 0.3 and 0.5 mg L-1 of IBA were tested. In the case of ‘Festival’, 1.0, 1.5 and 2.0 mg L-1 of TDZ combined with 0.1 and 0.3 mg L-1 of IBA were evaluated. Another aim was to define the lowest concentration of the selective agent Kanamycin (marker gene npt II) able to inhibit regeneration of the untransformed shoots. For this purpose, Kanamycin doses of 0, 2, 4, 6, 8 and 10 mg L-1 were added to the pre-established regeneration medium. In the petiole explant test, normal shoot regeneration did not occur; thus, only shoot regeneration and the sensitivity to Kanamycin from leaf explants were analyzed. For ‘Camiño Real’ the best shoot regeneration was established with a combination of 2.0 mg L-1 of TDZ + 0.1 mg L-1 of IBA. On the other hand, for ‘Festival’ the best shoot regeneration was established with a combination of 2.5 mg L-1 of TDZ + 0.1 mg L-1 of IBA. As far as Kanamycin sensitivity is concerned, total inhibition of the shoots was observed with 10 mg L-1 with both cultivars.

Organogenesis and plant selection by kanamycin of strawberry in vitro aiming at genetic transformation