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Estudios previos sugieren que, al igual que en otras infecciones por retrovirus, las hormonas esteroideas serían capaces de dirigir la expresión del virus de Maedi-Visna (MVV) mediante la interacción con los Elementos de Respuesta a Hormona (HRE) de la región promotora/reguladora LTR (Repeticiones Largas Terminales) del genoma del provirus. El objetivo de este trabajo fue la evaluación del efecto del cortisol, progesterona y dehidroepiandrosterona (DHEA) sobre la capacidad transcripcional de la región LTR de MVV mediante ensayos de transfección en fibroblastos ovinos con plásmidos pAcGFP (que contiene el gen para la GFP, proteína verde fluorescente) en los que se había clonado la región U3-cap del LTR de distintas cepas de MVV. La actividad transcripcional del LTR se evaluó a través de la cuantificación de la expresión de la GFP por citometría de flujo con las distintas concentraciones de cada hormona tras 48 horas de incubación. En la mayoría de los ensayos se observó un claro efecto inhibitorio de la transcripción del LTR a elevadas concentraciones hormonales, disminuyendo el efecto a medida que se diluía la hormona, llegando incluso en el caso de cortisol y de DHEA a producirse un incremento de la expresión a partir de 10-7M. En general no se pudo asociar una diferente respuesta con el origen de la cepa estudiada lo que sugiere que no está relacionado con los distintos orígenes/tropismos de los virus. Estos datos sugieren la presencia de un sitio HRE capaz de responder a estimulación hormonal en el LTR de MVV.Previous studies suggest that steroid hormones may direct the expression of Maedi-Visna virus (MVV), as has been observed in other retroviral infections. This would be achieved through the promoter/regulator region of the LTR (long terminal repeats) of the proviral genome, which would contain hormone responsive elements (HRE). The aim of this study was to evaluate the effect of cortisol, progesterone and dehydroepiandrosterone (DHEA) on the transcriptional ability of the MVV LTR region. For this, sheep fibroblasts were transfected with pAcGFP plasmids (containing the gene for green fluorescent protein, GFP) in which the U3-cap region of the LTR of different strains of MVV had been cloned. Different concentrations of each hormone were added to transfected cells and the transcriptional activity of the LTR was evaluated after 48 hours of incubation by quantifying the expression of GFP by flow cytometry. A clear inhibitory effect of the transcriptional ability of the LTR was observed in most of the assays at high hormonal concentrations. This effect decreased with the increasing dilutions of the hormones, to the point that GFP expression was above baseline in cells transfected with several of the plasmids and treated with dilutions above 10-7M of cortisol and DHEA. In general terms, a different response could not be associated to the origin of the strain under study, suggesting that the effect of steroids is not related to the different origins/tropisms of the virus. These data suggest the presence of a hormone responsive element (HRE) in the MVV LTR able to respond to hormonal stimulation

Efecto de la progesterona, cortisoly dhea sobre la actividad transcripcional del LRT del virus de Maedi-VIsna