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A salmonelose e uma das zoonoses mais importantes em todo o mundo, e desde a decada de 80, ocorreu um notavel aumento no relato de isolamentos de Salmonella Enteritidis. Desta forma, torna-se cada vez mais relevante e necessaria a implementacao de tecnicas que visem a sua deteccao e identificacao mais acuradas. Numa primeira etapa, este trabalho teve como objetivo avaliar a combinacao da PCR com caldos de enriquecimento seletivo (PCR-RV) e nao seletivo (PCR-NS) para a deteccao e identificacao de Salmonella sp. em amostras de origem avicola. A PCR-RV detectou significativamente mais amostras positivas para Salmonella do que a PCR-NS. A tecnica microbiologica convencional tambem foi comparada as outras duas, mostrando ser mais sensivel do que a PCR-NS, porem menos sensivel do que a PCRRV. Em relacao a identificacao dos sorovares Typhimurium, Enteritidis, Gallinarum e Pullorum, a PCR-RV apresentou resultados similares a tecnica convencional e ambas foram mais sensiveis do que PCR-NS. Na segunda etapa, foram caracterizadas 111 culturas de S . Enteritidis isoladas de humanos, alimentos, carcacas de frango, aves e suinos atraves de rep-PCR, presenca de genes de virulencia, resistencia a antimicrobianos e da combinacao destes com a fagotipagem. No teste de resistencia a antimicrobianos, foi observada uma alta prevalencia de resistencia aos antimicrobianos testados. Os isolados de produtos de origem avicola apresentaram resistencia significativamente maior a gentamicina, estreptomicina e ao acido nalidixico do que os demais isolados. Os maiores niveis de resistencia foram encontrados para sulfonamida e nitrofurantoina. Foram detectados 27 diferentes perfis de resistencia antimicrobiana nos isolados analisados. Quanto a deteccao de genes de virulencia por PCR, o inv A foi detectado em todos os isolados, enquanto os genes spv R e spv C foram detectados em 91,2% e 90,2% dos isolados, respectivamente. Na rep-PCR, em cada uma das tres diferentes tecnicas (REP, ERIC e BOX-PCR) foram gerados tres perfis. Os isolados nao foram discriminados adequadamente, uma vez que a maioria deles foi agrupada em um mesmo perfil. Esta tecnica apresentou poder discriminatorio menor do que a fagotipagem. Uma alternativa para proporcionar a discriminacao destes isolados foi a associacao com outros metodos de tipificacao. Quando foram associados os resultados da rep-PCR, fagotipagem, presenca de genes de virulencia e resistencia a drogas antimicrobianas, foram observados 48 diferentes tipos entre os 111 isolados. Concluiu-se que a rep-PCR, como um unico metodo, nao foi adequada para a tipificacao destes isolados de S . Enteritidis.

acta scientiae veterinariae

Detecção de Salmonella sp. e caracterização de isolados de Salmonella Enteritidis pela presença de genes de virulência, resistência a antimicrobianos e rep-PCR Fingerprinting