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The Asparagaceae family includes several genera adapted to survive at high temperatures and with low water availability. These include Agave, Beaucarnea, Dasylirion, Nolina and Yucca. Mexico has a great biodiversity in these plant groups, as well as an ancestral tradition regarding its use. In vitro propagation systems are efficient for the production of these plants and can be used to perform various types of studies. Among these are the studies of tolerance to heavy metals, which can serve to determine which species are suitable for reforestation and regeneration of areas contaminated by mining activities. Method: In this work, 20 species of the family Asparagaceae were propagated in vitro and their rooting process was evaluated in culture media added with Cd, Cu, Cr, Fe, Mn, Pb and Zn. The development of roots in the presence of these metals was analyzed and its absorption capacity was determined by flame atomic absorption spectrophotometry. With these data, translocation and bioaccumulation factors were calculated in order to characterize the response of each species to heavy metals. Results: The highest number of shoots occurred in the species Beaucarnea recurvata, which generated 5.7 shoots per explant and Nolina durangensis with 5.6. Chromium treatment was toxic for most species. Agave celsii, A. chiapensis, A. obscura, A. palmeri and A. salmiana formed roots in all treatments. According to translocation and bioaccumulation factors, the analyzed species were classified as phytostabilizers, exclusors, bioaccumulators and indicators. The species A. chiapensis, A. obscura and A. palmeri were bioaccumulators for Mn. A. celsii and A. salmiana presented mechanisms of phytostabilization and exclusion. Conclusion: In vitro propagation allows to work and study a wide range of species in the presence of contaminants. The Agave genus is tolerant to metals and can be used to phytostabilize and remediate contaminated soils. Perales Aguilar et al. No 24, Vol. 12 (1), 2020. ISSN 2007 – 0705, pp.: 1 22 3 Introducción Las zonas áridas, semiáridas y subhúmedas representan el 41% de la superficie del mundo, y albergan el 20% de la diversidad vegetal (Bran y Gaitán, 2012). México no es la excepción en este sentido, y este tipo de ecosistemas ocupan la mayor parte del territorio. Esto ha convertido a nuestro país en uno de los mayores centros de distribución de especies vegetales adaptadas a estas condiciones. La familia Asparagaceae agrupa a varios géneros de gran importancia, como Agave, Beaucarnea, Dasylirion, Nolina y Yucca, mismos que incluyen una gran cantidad de especies endémicas. Muchas de estas especies se encuentran bajo protección especial, amenazadas, o en peligro de extinción, debido a la sobreexplotación y destrucción de su hábitat (Eguiarte et al., 2013; Encina-Domínguez et al., 2013; Magallán-Hernández et al., 2014). Por otro lado, estos grupos vegetales han sido aprovechados desde la época prehispánica debido a sus innumerables usos. Son fuente de alimentos, bebidas, fibras y materias primas para la elaboración de artesanías. Recientemente se les han encontrado usos no tradicionales, como la producción de compuestos químicos de alto valor, edulcorantes y biocombustibles, lo que le confiere más importancia a su conservación y uso racional (García et al., 2017). En este sentido, la propagación in vitro es una herramienta útil para la conservación de especies de estos grupos. Esta metodología consiste en la rápida multiplicación de plantas mediante el uso de medios de cultivo artificiales adicionados con reguladores de crecimiento en un ambiente controlado (fotoperiodo y temperatura), todo bajo condiciones axénicas. La propagación in vitro permite también evaluar de una manera más sencilla y controlada la capacidad de respuesta de las plantas ante diversos factores de estrés, por ejemplo la presencia de metales pesados. Esto debido a que los mismos pueden ser incorporados al medio de cultivo en cantidades precisas con el fin de analizar la respuesta de la planta ante los mismos (Di Lonardo et al., 2011; Ashrafzadeh y Leung, 2015). De esta forma pueden estudiarse los diversos mecanismos de tolerancia a los metales tales como sistemas antioxidantes, unión de moléculas orgánicas con el metal, fitoestabilización, exclusión y acumulación (Srivastava, 2016; Sruthi et al., 2017). De acuerdo con el mecanismo de tolerancia que posean, las plantas pueden clasificarse en las siguientes categorías: a) Bioacumuladoras. También conocidas como hiperacumuladoras. Toman el metal a través de la raíz y lo translocan a la parte aérea en donde se acumula y alcanza concentraciones mayores a las del suelo, esto sin mostrar síntomas de toxicidad. Estas plantas Análisis in vitro de la acumulación de metales pesados en plantas de la familia Asparagaceae tolerantes a la baja disponibilidad de agua No 24, Vol. 12 (1), 2020. ISSN 2007 – 0705, pp.: 1 22 4 pueden ser usadas para la biorremediación ya que pueden remover los metales del suelo. b) Fitoestabilizadoras. Estas plantas toman y acumulan el metal en la raíz, pero sin translocarlo a la parte aérea. Este mecanismo también es útil para la biorremediación ya que fija los metales pesados impidiendo su lixiviación y posterior llegada a los cuerpos de agua (Memon et al., 2001; Lu et al., 2017). c) Exclusoras. No permiten la entrada de los metales a la raíz, esto a través de la excreción de compuestos orgánicos que forman complejos con los metales en el suelo. d) Indicadoras. Permiten el paso del metal a través de la raíz y su llegada a la parte aérea, alcanzando concentraciones en sus tejidos similares a las presentes en el suelo. Suelen presentar síntomas visibles que son proporcionales a la cantidad de metal presente en el suelo (Baker and Brook 1989; Tosié et al., 2016). Existe elevada vulnerabilidad en los ecosistemas de zonas áridas a las actividades mineras, mismas que contaminan el suelo con metales pesados afectando su potencial ecológico y biológico, llegando a la degradación y posteriormente a la pérdida del suelo (Alipur et al., 2016; Hu et al., 2018). El Agave americana tiene mecanismos de exclusión para Cr debido a que se acumula principalmente en las raíces por lo que tiene un enorme potencial de fitoestabilización de Cr (Ramana et al., 2016). Los Agaves, y otros géneros relacionados, son elementos clave para la estructura y funcionamiento de los ecosistemas de las zonas áridas y semiáridas, por lo que es importante conocer su respuesta ante la presencia de metales pesados en el suelo. El contar con plantas de zonas áridas y semiáridas tolerantes a metales permitiría utilizar estas especies para procesos de rehabilitación de áreas contaminadas (Solanki y Dhankhar, 2011). El objetivo de este estudio fue analizar la susceptibilidad de especies de la familia Asparagaceae tolerantes a la baja disponibilidad de agua ante los metales pesados Cd, Cu, Cr, Fe, Mn, Pb y Zn en condiciones in vitro. Materiales y Métodos Material vegetal Se seleccionaron 20 especies de la familia Asparagaceae de talla mediana y grande, que pudieran ser usadas en la restauración de ecosistemas contaminados por metales pesados. Los tejidos se tomaron del Banco de Germoplasma in vitro de la Unidad de Biotecnología Vegetal de la Universidad Autónoma de Aguascalientes (UAA), México. Las especies seleccionadas fueron: Agave bracteosa S. Watson ex Engelm, A. celsii Hook., A. chiapensis Jacobi, A. difformis A. Perales Aguilar et al. No 24, Vol. 12 (1), 2020. ISSN 2007 – 0705, pp.: 1 22 5 Berger, A. funkiana K. Koch  C. D. Bouché, A. obscura Schiede ex Schltdl., A. palmeri Engelm, A. peacockii Croucher, A. potatorum Zucc., A. victoria-reginae T. Moore, A. salmiana Otto ex Salm-Dyck, A. titanota Gentry, Beaucarnea goldmanii Rose, B. recurvata Lem., Dasylirion acrotriche (Shiede) Zucc., D. glaucophyllum Hook., Nolina durangensis Trel.,Yucca carnerosana (Trel.) Mckelvey, Y. filamentosa L. y Y. filifera Chabaud. Propagación in vitro del material vegetal Se usaron plántulas generadas in vitro, de las cuales se eliminó la parte apical de las hojas para obtener un explante basal. Se colocaron cuatro explantes en frascos de 250 mL, conteniendo 50 mL de medio Murashige y Skoog, (MS) (1962), pH de 5.7 con 3% (w/v) de sacarosa y 8 g L -1 de agar como gelificante. Se adicionaron 2 mg L -1 de benciladenina (BA) para los géneros Agave y Yucca, para el resto de las especies se usó el mismo medio pero adicionados con 2.5 mg L -1 de BA. Los cultivos se mantuvieron a 25  2 °C, con fotoperiodo de 18/6. A los tres meses se cuantificó el número de brotes generados y su longitud, con una n=16 (explantes). Los brotes generados se utilizaron en las fases posteriores del estudio. Enraizamiento de brotes in vitro y análisis de la susceptibilidad a los metales pesados Los brotes obtenidos en la etapa de propagación se transfirieron a medio MS sin metales (control) o en medio MS conteniendo metales pesados para su enraizamiento. Las concentraciones de metales seleccionados fueron a) 0.005 mM de CdCl2; b) 0.2 mM de CuSO4·5H20; c) 1 mM de KCr2O7; d) 1 mM de FeSO4·7H2O; e) 0.4 mM de Pb(NO3)2; f) 1.6 mM de MnSO4·H2O y g) 0.48 mM de ZnSO4·7H2O, todas las sales presentaban 99% de pureza, de grado de reactivo y marca SIGMA. Las concentraciones de metales a probar se seleccionaron de acuerdo a lo reportado en la literatura (Gatti, 2008; Ayari et al., 2010; Perveen y Anis, 2012; Wiszniewska et al., 2017). Se incluyeron tres brotes por tratamiento con tres réplicas. Los brotes se mantuvieron a 25  2 °C, con fotoperiodo de 18/6. Después de dos meses de iniciado el experimento se registraron los datos de supervivencia y enraizamiento de los brotes. Posteriormente, las plántulas que sobrevivieron y generaron raíz se sacaron del recipiente de cultivo y las raíces se lavaron cuidadosamente para eliminar restos de medio. Las plántulas fueron fotografiadas con una cámara SONY de 20.1 megapixeles y las fotografías fueron analizadas con el