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Background: Forage characteristics can modify in vitro methane production. There is little information about in vitro methane production of legumes and grasses at different maturity stages in tropical highland grazing systems. Objective: To evaluate the effect of species and forage maturity on in vitro methane production. Methods: Four forage species grown in tropical highlands of Colombia, two grasses: Kikuyu ( Cenchrus clandestinus, previously named Pennisetum clandestinum ) and ryegrass ( Lolium perenne var. Samsum), and two legumes: Lotus ( Lotus uliginosus var. Maku) and red clover ( Trifolium pratense ) were harvested in two paddocks at three maturity stages (young, intermediate, and mature). In vitro 48 h gas production was measured and methane proportion in gas was quantified by gas chromatography. Data were analysed as a randomized complete block (paddocks) design with a factorial arrangement 4×3 (4 species × 3 maturity stages) using the GLM procedure of SAS ® . Results: Lotus produced less methane (p<0.01) than ryegrass, clover, and kikuyu (35.5 vs 64.7, 55.7 or 51.4 mL/g degraded organic matter, respectively). Younger forages produced less methane than intermediate and mature forages (42.8 vs 56.3 and 56.4 mL/g degraded organic matter, respectively). Cellulose concentration and organic matter degradability explained 67% (p<0.01) of methane production. Conclusion: Forage composition, presence of condensed tannins, and changes in fermentation patterns may explain the differences observed in in vitro methane production among species and maturity stages. Keywords : grassland systems, kikuyu, lotus, methanogenesis, red clover, ryegrass. Resumen Antecedentes: Las caracteristicas de los forrajes pueden afectar la produccion de metano. Hay poca informacion sobre la produccion de metano de leguminosas y gramineas en diferentes estados de madurez en los sistemas pastoriles de tropico alto. Objetivo: Evaluar el efecto de la especie y la madurez de los forrajes sobre la produccion de metano in vitro . Metodos: Cuatro especies forrajeras de tropico alto colombiano, dos gramineas: Kikuyo ( Cenchrus clandestinus, anteriormente llamado Pennisetum clandestinum) y ryegrass ( Lolium perenne var. Samsum) y dos leguminosas: Lotus ( Lotus uliginosus var. Maku) y trebol rojo ( Trifolium pratense ), fueron cosechadas de dos parcelas en tres estados de madurez (joven, intermedio y maduro). Se midio la produccion de gas in vitro a las 48 h y la proporcion de metano en el gas por cromatografia de gases. Los datos se analizaron empleando un diseno de bloques completos al azar (parcelas) con un arreglo factorial 4×3 (4 especies × 3 estados de madurez) mediante el procedimiento GLM de SAS ® . Resultados: El lotus produjo menos metano (p<0,01) que el ryegrass, trebol o kikuyo (35,5 vs 64,7, 55,7 o 51,4 mL/g materia organica degradada, respectivamente). Los forrajes jovenes produjeron menos metano que aquellos de edad intermedia y madura (42,8 vs 56,3 y 56,4 mL/g materia organica degradada, respectivamente). La concentracion de celulosa y la digestibilidad de la materia organica explicaron el 67% (p<0,01) de la produccion de metano. Conclusion: La composicion de la pastura, la concentracion de taninos condensados y los cambios en los patrones de fermentacion pueden explicar las diferencias en la produccion de metano in vitro segun la especie y madurez del forraje. Palabras claves: kikuyo, lotus, metanogenesis, ryegrass, sistemas pastoriles, trebol rojo. Resumo Antecedentes: As carateristicas das forragens podem modificar a producao de metano. Existe pouca informacao sobre a producao de metano de leguminosas e gramineas em diferentes fases de maturidade nos sistemas de pastoreio de tropico alto. Objetivo: Avaliar o efeito da especie e a maturidade das forragens sobre a producao de metano in vitro . Metodos: Quatro especies de forragens de tropico alto colombiano, duas gramineas: Capim quicuio ( Cenchrus clandestinus), antigamente chamado Pennisetum clandestinum ) e azevem ( Lolium perenne var. Samsum) e duas leguminosas: Trevina ( Lotus uliginosus var. Maku) y trevo ( Trifolium pratense ), foram colhidas de duas parcelas diferentes em tres fases diferentes de maturidade (jovem, intermedia e madura). Foi avaliada a producao de gas in vitro as 48 h e a proporcao de metano foi determinada por cromatografia de gases. Os dados foram analisados com um delineamento em blocos ao acaso (parcelas) com um arranjo fatorial 4×3 (4 especies × 3 fases de maturidade) utilizando o procedimento GLM de SAS ® . Resultados: Trevina produz menos metano (p<0,01) que azevem, trevo o capim quicuio (35,5 vs 64,7, 55,7 ou 51,4 mL/g materia orgânica degradada, respetivamente). Forragens jovens produzem menos metano que forragens com idade intermedia e matura (42,8 vs 56,3 y 56,4 mL/g materia orgânica degradada, respetivamente). A concentracao de celulosa e a digestibilidade da materia orgânica explicaram o 67% (p<0,01) da producao de metano. Conclusao: A composicao da pastagem, a concentracao de taninos condensados e as mudancas nos padroes de fermentacao podem explicar as diferencias na producao de metano in vitro entre especies e maturidade de forragens. Palavras-chave: kikuyo, metanogenese, ryegrass, sistemas de pastorais, trevina, trevo.

Methane production from four forages at three maturity stages in a ruminal in vitro system