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A estrutura mais superficial da epiderme dos frutos é constituída por fina camada de cera, responsável por mecanismos de proteção, principalmente relacionados à evapotranspiração e ao ataque de patógenos. A visualização de cera por microscopia eletrônica de varredura apresenta dificuldades no processamento da amostra, pois os métodos rotineiramente utilizados ocasionam sérios danos a esta camada ou, simplesmente, provocam sua eliminação devido ao processo de solubilização causado pelos reagentes utilizados. Alguns autores têm utilizado temperaturas baixas (-90ºC) para o processamento de amostras. No Brasil, tentativas de observação de cera em maçãs, utilizando a microscopia eletrônica de varredura, têm sido realizadas; entretanto, os resultados não foram satisfatórios. No Laboratório de Microscopia Eletrônica da Embrapa Clima Temperado, foi adaptado um método simples e que tem apresentado bons resultados. Para este experimento, foram retiradas pequenas porções da casca de maçãs da região equatorial dos frutos. As amostras foram fixadas em lâminas histológicas, utilizando fita adesiva nas extremidades. Posteriormente, foram colocadas em dessecador contendo sílica gel, para que ocorresse a desidratação. Após 72 horas, foram retirados fragmentos para fixação em stubs e metalização com ouro. Foi usado um microscópio eletrônico ZEISS (DSM-940A), regulado à distância de trabalho de 15mm, voltagem de aceleração de 10 kV e ampliação de 3.000 X. As imagens obtidas permitiram avaliar a interferência dos fatores ambientais utilizados no processo de frigoconservação de maçãs. The fruit epidermis is covered by a thin layer of wax which gives protection to the fruit, mainly against water loss and pathogenic organisms. Several studies using scanning electron microscope have been developed to study that wax. The wax layer visualization through the scanning microscope is difficult due to some problems of sample preparation. The usual procedures cause serious damages to the wax layer or even eliminate it because of its solubilization by some of the reagents. Several researchers have kept the samples at very low temperature (-90ºC) during the preparation. Wax observations in Brazil by using electronic scanning microscope have been performed, however in some of them results were not consistent. A relatively simple procedure at the Laboratory of Electron Microscopy at Embrapa Temperate Climate has been tried to overcome such difficulties. Such procedure consists of collecting a small piece of the fruit epidermis (1cm²) taken from the equatorial part of the apples. After sampling it the piece of epidermis is placed on a glass slide hold by the extremes with a sticky tape. The sample on glass slide is kept for 72 hours into a dessicator containing drierite for the sample dehydration. Then, small pieces of the sample (2 mm²) were taken and hold on stubs followed by metalization in gold. Following that, the sample is observed using a Zeiss (DSM - 940A) electronic microscope at a working distance of 15 mm and acceleration voltage of 10 KV. The obtained images made possible to evaluate the action of some experimental treatments which have been used on apples during cold storage

Metodologia para observação da camada de cera em maçãs, utilizando microscopia eletrônica de varredura